發布時間：2021-04-06所屬分類：農業論文瀏覽：1次
摘 要： 摘 要：為研究氨氣與過氧乙酸戊二醛復方消毒劑(簡稱復方消毒劑)相互中和的效果及氨氣對消毒效果的影響，通過測定不同劑量512倍稀釋的復方消毒劑，在不同作用時間、不同氨氣濃度時，噴霧消毒前后氣霧柜內細菌數量和氨氣質量濃度，計算殺菌率和氨氣中和率，以
摘 要：為研究氨氣與過氧乙酸戊二醛復方消毒劑(簡稱復方消毒劑)相互中和的效果及氨氣對消毒效果的影響，通過測定不同劑量512倍稀釋的復方消毒劑，在不同作用時間、不同氨氣濃度時，噴霧消毒前后氣霧柜內細菌數量和氨氣質量濃度，計算殺菌率和氨氣中和率，以確定512倍稀釋的復方消毒劑對氨氣的中和效果及高濃度氨氣對其殺菌效果的影響。結果顯示：在氨氣質量濃度為40.98mg/m3時，512倍稀釋的復方消毒劑分別以15、30、60mL/m3劑量噴霧，作用30min后，氨氣中和率分別為13.3%、17.8%、54.0%;在氨氣質量濃度分別為40.98、48.57、56.16mg/m3時，512倍稀釋的復方消毒劑以15mL/m3噴霧消毒，作用30min后，殺菌率分別為100%、99.6%、99.2%。結果表明：在氨氣質量濃度40.98mg/m3，作用30min后，512倍稀釋的復方消毒劑，噴霧劑量60mL/m3可實現理想的中和氨氣效果，15mL/m3可實現理想的消毒效果。
關鍵詞：過氧乙酸戊二醛復方消毒劑;氨氣濃度;空氣消毒;中和效果;殺菌效果
消毒劑可用于殺滅環境和傳播媒介上的病毒和細菌等病原微生物，以阻斷病原的傳播流行。合理使用消毒劑消毒是養殖場生物安全控制的一項非常重要的措施[1]。消毒劑種類以及殺菌效果好壞，會直接影響畜禽養殖環境的生物安全，從而影響動物和人的健康與安全。某些畜禽養殖業消毒不規范，導致很多病原微生物對單一化學成分的消毒劑產生了較強的抵抗力[2]。而各類消毒劑合理復配后，其殺菌作用遠大于單一種類消毒劑。過氧乙酸戊二醛復方消毒劑(簡稱復方消毒劑)是一種低成本、高效、抗干擾的復方消毒劑，具有殺菌范圍廣和有效使用濃度低等優點[3]。
畜禽舍中的氨氣主要來源于兩方面：一是從動物胃腸道排出;二是堆積的排泄物和舍內的墊料等有機物質，經過微生物分解而產生[4]。畜禽舍內氨氣的大量存在會對動物健康造成傷害。研究[5]發現：當雞舍內氨氣質量濃度達到15.18mg/m3時，雞群食欲會明顯下降，其生產性能及對抗各種疾病的抵抗力也會降低或減弱;當氨氣質量濃度達到37.95mg/m3時，雞只死亡率會明顯增加。已有研究[6-7]表明，雞舍內氨氣平均質量濃度為18.58~36.07mg/m3。黃曉露等[8]發現，封閉式仔豬高床保育舍內的氨氣質量濃度為30.36~32.63mg/m3;詹凱等[9]研究發現，豬舍內氨氣質量濃度可達24.77mg/m3。總之，畜禽舍內氨氣質量濃度一般不超過40mg/m3。我國農業行業標準[10]規定的畜舍環境中日均氨氣質量濃度為：雛雞舍不超過10mg/m3，成年雞舍不超過15mg/m3，豬舍不超過25mg/m3，牛舍不超過20mg/m3。因此，必須及時清除養殖場舍中的氨氣，使其降至合理的范圍內。降低畜舍內氨氣濃度的方法，除了減少氨氣排放外，還可以通過化學方法，如噴灑過氧乙酸，其機理在于兩者能夠結合形成醋酸銨，同時還能達到消毒的效果[11]。
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復方消毒劑的主要有效成分是過氧乙酸，其噴霧消毒的氨氣降低效果以及對消毒效果的影響尚不清楚。本試驗旨在通過測定不同復方消毒劑劑量、不同噴霧作用時間的氨氣濃度以及不同氨氣濃度下的殺菌率，確定最低有效濃度的復方消毒劑對氨氣的中和效果，以及高濃度氨氣對其殺菌效果的影響，以期為該消毒劑的推廣使用提供依據。
1 材料與方法
1.1 試驗材料
1.1.1 試劑與菌株 復方消毒劑(批號202001)，來自山西農業大學動物醫學學院獸醫病理實驗室;甘氨酸(批號916S066)、卵磷脂(批號601l024)，Solarbio公司產品;吐溫80(批號301C053)，天津市化學試劑三廠產品;硫代硫酸鈉(批號800628-2)，天津市天力化學試劑有限公司產品;普通營養瓊脂(批號00008-20190910)、普通肉湯瓊脂培養基(批號00007-20170627)，青島海博生物技術有限公司產品;氨水(批號201909)，天津市登豐化學品有限公司產品;白色葡萄球菌8032，山西農業大學動物醫學學院獸醫病理實驗室保存。
1.1.2 儀器及設備 氣霧柜，山西農業大學動物醫學學院獸醫病理實驗室自制;全自動高壓滅菌鍋(型號HVE-50)，日本三洋集團產品;微量加樣器(型號eppendorf)，ThermoElectron公司產品;超凈工作臺(型號SW-CJ-1F)，北京昌平長城空氣凈化工程公司生產;隔水恒溫箱(型號ZXGP-A2050)，上海智城分析儀器制造有限公司產品;液體撞擊式微生物氣溶膠采樣器(型號JWL-6)，金壇市華邦電子儀器有限公司產品;電子天平(型號AR124CN)，奧豪斯公司生產;電動氣溶膠噴霧器(型號K-3)，上海羅迪公司生產;氨氣測定儀(型號SGA-600-NH3)，深圳市深國安電子科技有限公司產品。
1.2 試劑配制
1.2.1 標準硬水配制 稱取氯化鈣(CaCl2)0.0608g和氯化鎂(MgCl2·6H2O)0.0278g，然后加去離子水至200mL，完全溶解后121℃壓力蒸氣滅菌20min以備使用。
1.2.2 復方消毒劑配制 取4mL復方消毒劑用滅菌標準硬水做2倍系列倍比稀釋，直至稀釋倍數為512倍。
1.2.3 采樣液配制 稱取0.50g甘氨酸、0.10g卵磷脂、0.50g吐溫80、0.25g硫代硫酸鈉、1.80g普通肉湯瓊脂定容至100mL，于121℃高壓滅菌20min以備用。
1.3 試驗方法
1.3.1 氨氣中和試驗 依據消毒技術規范[12]中的空氣消毒試驗操作程序，調節對照組和試驗組氣霧柜的溫度為20~25℃，相對濕度為50%~70%。將0.5cm口徑噴槍壓力設定為0.5kPa，噴霧流量為5mL/min，向氣霧柜內噴霧1mL25.0%的氨水，使氣霧柜內氨氣質量濃度為40.98mg/m3。待傳感器的氨氣質量濃度顯示值穩定后(30min)，將不同劑量(7.5、15.0、30.0mL)512倍稀釋的復方消毒劑或滅菌去離子水噴霧于氣霧柜內，記錄5、10、20、30min時的氨氣質量濃度，并計算氨氣中和率，重復3次。氨氣中和率的計算方法：氨氣中和率=(消毒前氨氣質量濃度-消毒后氨氣質量濃度)/消毒前氨氣質量濃度×100%。
1.3.2 消毒效果影響試驗
按照1.3.1中的方法調節氣霧柜，向氣霧柜內噴霧不同劑量(1.0、1.3、1.6mL)25.0%的氨水，待氣霧柜內傳感器的氨氣質量濃度顯示值穩定后(30min)，將5×106cfu/mL白色葡萄球菌懸液5mL均勻噴霧于氣霧柜中，邊噴霧染菌邊開啟風扇攪拌(使氣溶膠均勻分散)，噴菌結束后再攪拌5min;靜置5min后，對氣霧柜使用添加中和劑的液體撞擊式采樣器進行消毒前采樣，采樣液10mL，采樣流量7mL/min，采樣8min。消毒前采樣后，將15mL/m3的512倍稀釋的復方消毒劑噴霧于氣霧柜內，同時另一氣霧柜以等劑量滅菌去離子水作為對照，密閉作用至規定時間(10、20和30min)采樣，同時記錄這3個時間點的氨氣質量濃度。采樣結束后，以5mL未使用的采樣液沖洗采樣瓶，沖洗液與已收集的10mL采樣液混合均勻后，吸取1mL接種于營養瓊脂培養基，37℃培養18h(各時間段樣本均接種兩個平皿)。
2 結果與分析
2.1 氨氣中和效果
3次重復試驗結果(表1)顯示：512倍稀釋的復方消毒劑或滅菌去離子水噴霧劑量≥15mL/m3，作用5min時，氨氣質量濃度開始下降;隨著噴霧劑量的增加和作用時間的延長，氨氣中和率逐漸增大。當512倍稀釋的復方消毒劑噴霧劑量達到60mL/m3，作用30min時，氨氣中和率可達54.0%。
2.2 消毒效果影響
消毒效果試驗結果(表2)顯示：隨作用時間延長，氣霧柜內氨氣質量濃度逐漸降低;隨著氨氣質量濃度的增加，復方消毒劑的消毒效果出現下降，而作用時間延長又使消毒效果增加。在氨氣質量濃度達到40.98mg/m3，作用30min時，復方消毒劑對白色葡萄球菌氣溶膠的殺滅率>99.9%，消毒效果合格;在氨氣質量濃度>40.98mg/m3、作用30min時，消毒劑未達到合格消毒效果。
3 討論
多項研究顯示，有多種消毒劑可降低畜舍內氨氣含量，效果也較好。崔東安[13]等將藍光消毒劑(主要成分為二氧化氯)1:1000稀釋噴霧消毒，分別作用4、8h后，氨氣質量濃度可由30.36mg/m3降至5.31mg/m3，中和率為82.5%。孫天竹等[14]在不同條件下檢測木醋液(主要成分為乙酸)對禽舍的除臭效果(臭氣成分以氨氣為主)，發現用60%的木醋液作用于雞舍污泥16h以上，氨氣中和率可達60%，除臭效果最佳。黃炎坤[15]等研究表明：噴灑0.5%過氧乙酸溶液作用3h后，可將12.86mg/m3氨氣中和至4.62mg/m3，中和率為64.1%;噴灑0.5%過氧乙酸溶液作用6h后，細菌總數會出現明顯降低，殺菌率為46.6%。
本研究顯示，512倍稀釋的復方消毒劑噴霧量為15mL/m3，在氨氣質量濃度≤40.98mg/m3，作用30min時，對白色葡萄球菌的殺滅率可達100%，可將氨氣質量濃度從40.98mg/m3降至27.60mg/m3，除氨效果明顯，消毒合格。但當氨氣質量濃度達到48.57mg/m3以上，作用30min時，消毒則不合格，表明512倍稀釋的復方消毒劑進行空氣消毒時，若想達到理想的消毒效果，氨氣的質量濃度須小于40.98mg/m3。
本研究表明：在氨氣質量濃度40.98mg/m3，作用30min后，512倍稀釋的復方消毒劑，噴霧劑量60mL/m3可實現理想的中和氨氣效果，15mL/m3可實現理想的消毒效果。——論文作者：田永清1，廖夏露2，鄭明學2，康慧鑫2，段步婷2
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