發布時間：2020-01-02所屬分類：醫學論文瀏覽：1次
摘 要： 摘 要：對不同產地的馬齒莧的質量進行分析與評價。以貴州、四川、北京、西安四個產地的馬齒莧藥材為研究對象，對其水溶性浸出物、醇溶性浸出物進行檢查。馬齒莧中水溶性浸出物 19.7%~35.7%之間、醇溶性浸出物在 10.8%~17.0%之間;采用紫外分光光度法測定馬齒
摘 要：對不同產地的馬齒莧的質量進行分析與評價。以貴州、四川、北京、西安四個產地的馬齒莧藥材為研究對象，對其水溶性浸出物、醇溶性浸出物進行檢查。馬齒莧中水溶性浸出物 19.7%~35.7%之間、醇溶性浸出物在 10.8%~17.0%之間;采用紫外分光光度法測定馬齒莧藥材中多糖和總黃酮含量。多糖含量在 3.54%~9.98%之間，總黃酮含量在 0.77%~0.97%之間。不同產地馬齒莧質量差異較大。
關 鍵 詞：馬齒莧;產地;多糖;總黃酮
馬齒莧(Purslane)為馬齒莧科(Portulacaceae)馬齒莧屬(Portulaca)的干燥地上部分，全草入藥，具有清熱解毒、涼血止血的功效。現代藥理研究表明，馬齒莧在抗菌、抗衰老、降血脂、降血糖等方面發揮著重要的藥理活性作用，臨床上常用預防高血壓、冠心病、糖尿病等常見疾病[1]。馬齒莧不僅可入藥，還是人們喜愛的食材，為天然野生佳蔬。
馬齒莧的化學組成復雜多樣，主要有多糖、黃酮、生物堿、萜類、揮發油等化學成分[2]。其中，馬齒莧的主要活性成分黃酮和多糖因含量高、作用廣，受到眾多科研工作者的關注，但研究內容主要集中在有效成分的提取、藥理及藥效等方面[3-7]。馬齒莧跨地區的質量分析鮮有報道。
對于馬齒莧的質量控制，2015 版《中國藥典》僅對馬齒莧藥材的性狀鑒別、顯微鑒別、薄層鑒別、水分檢查做了規定，未對其有效成分及其質量控制進行記載[8]。
為了更加科學客觀的評價馬齒莧藥材的質量，在完成藥典規定項目的基礎上，本文對四川、貴州、北京、西安四產地的馬齒莧藥材進行浸出物檢查，并以藥理作用明確的活性成分多糖和黃酮成分作為指標成分，進行含量測定，對馬齒莧藥材進行質量分析，為馬齒莧藥材的進一步研究與開發和質量標準的修訂提供一定的科學依據。
1 實驗部分
1.1 儀器
Cary60 紫外-可見分光光度計(安捷倫科技有限公司)、GR-202 型分析天平(日本 AND 公司)、 MD 100-2 型上皿電子天平(上海天平儀器廠)、 MH-500 調溫型電熱套(北京科偉永興儀器有限公司)、KQ5200DE 型超聲提取儀(昆山市超聲儀器有限公司)、SHZ-D 循環水式真空泵(鞏義市予華儀器有限公司)、恒溫水浴鍋(河北省黃驊航天儀器廠)、恒溫鼓風干燥箱(上�，� 實驗設備有限公 玕司)。
1.2 材料
葡萄糖標準品(批號：110833-201205，中國食品 藥 品 檢 定 研 究 院 ) 蘆 丁 標 準 品 ( 批 號 ： 10080-200707，中國藥品生物制品檢定所)、乙醇(天津市河東區紅巖試劑廠，分析純)、石油醚(天津市河東區紅巖試劑廠，分析純)、苯酚(分析純，西安化學試劑廠)、濃硫酸(分析純，西安化學試劑廠)、亞硝酸鈉(天津市巴斯夫化工有限公司)、硝酸鋁(西安化學試劑廠，分析純)、氫氧化鈉(開封東大化工有限公司試劑廠，分析純)、實驗用水為蒸餾水、馬齒莧藥材(批號：2013.08.20 產地：貴州 、四川、北京、西安)。
2 實驗方法
2.1 鑒別[8]
取本品粉末 2 g，加水 2 mL，加甲酸調節 pH 值至 3~4，冷浸 3 h，濾過，濾液蒸干，殘渣加水 5 mL 使溶解，作為供試液。另取馬齒莧對照藥材 2 g，同法制成對照藥材溶液，照薄層色譜法試驗。
吸取上述兩種溶液各 1~2 μL，分別點樣于同一硅膠 G 薄層板上，以飽和正丁醇-冰醋酸-水(4:1:1)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以 0.2% 茚三酮乙醇溶液，在 110 ℃加熱至斑點顯色清晰。按照 2015 版四部薄層色譜法分析，在與馬齒莧對照藥材色譜相應的位置上顯相同顏色的斑點，二者具有相同的色譜行為，結果見圖 1。
2.2 浸出物測定
按照《中國藥典》2015 版四部浸出物測定法項下的熱浸法(通則 2201)，對馬齒莧進行藥材水溶性和醇溶性浸出物的含量測定。
2.2.1 水溶性浸出物測定
取供試品約 1.0 g，精密稱定，置 50 mL 具塞錐形瓶中，精密加水 25 mL，密封稱重定量，靜置 1 h后，連接回流冷凝管，加熱至沸騰，并保持微沸 1 h，放冷后，取下錐形瓶，密塞，再稱定重量，用水補足減失的重量，搖勻，用干燥濾器濾過，精密量取濾液 10 mL，置已干燥至恒重的蒸發皿中，在水浴上蒸干后，于 105 ℃干燥 3 h ，置干燥器中冷卻 30 min，迅速精密稱定重量。除另有規定外，以干燥品計算供試品中水溶性浸出物的含量(公式(1))，結果見表 1。
浸出物含量(%)=(W3-W1)×25/(10×W2)× 100%
2.2.2 醇溶性浸出物測定
以 75%乙醇(v/v)溶液代替蒸餾水為溶劑，照水溶性浸出物測定法測定，結果見表 1。以 75%乙醇(v/v)溶液代替蒸餾水為溶劑，照水溶性浸出物測定法測定，結果見表 1。
2.3 馬齒莧多糖的含量測定[9]
2.3.1 葡萄糖標準溶液的制備
精密稱取 105 ℃干燥至恒重的葡萄糖標準品適量，加蒸餾水溶解稀釋，配制濃度為 83.7μg·mL-1 的標準溶液。
2.3.2 供試品溶液制備
稱取馬齒莧樣品粉末(過 20 目篩)10 g，按料液比 1:12.5 加入石油醚，索氏提取約 5 h，揮干乙醚，得馬齒莧脫脂樣品。
精密稱取馬齒莧脫脂樣品適量，置具塞錐形瓶中，按料液比 1:30 精密加入蒸餾水，浸泡 10 h，于 60 ℃超聲提取 25 min，取適量續濾液 5 倍稀釋后作為樣品供試液。
2.3.3 樣品含量測定
精密吸取供試液 0.1 mL 至 10 mL 容量瓶中，加入蒸餾水補足至 1.0 mL，苯酚-硫酸法顯色，487 nm 測定吸光度，計算藥材中多糖的含量，結果見表 2。
2.4 馬齒莧總黃酮的含量測定[9]
2.4.1 蘆丁標準溶液的制備
精密稱取蘆丁標準品加 75%乙醇(v/v)溶液溶解，配制成濃度為 0.205 4 mg·mL-1的標準溶液。
2.4.2 供試品溶液制備
精密稱取適量脫脂樣品，置于具塞錐形瓶中，按料液比 1∶25，精密 75%乙醇(v/v)25 mL，靜置 10 h，于 40 ℃超聲提取 80 min，過濾，取續濾液作為供試品溶液。
2.4.3 樣品含量測定
精密吸取供試液 1.0 mL 至 10 mL 容量瓶中，加入 75%乙醇補足至 5.0 mL，亞硝酸鈉-硝酸鋁法顯色，506 nm 處測定吸光度，計算藥材中總黃酮的含量，結果見表 2。
3 結論與討論
3.1 結論
不同產地的馬齒莧藥材浸出物含量不同，水浸出物和醇浸出物含量順序也不相同。水溶性浸出物變化幅度在 19.7%~35.7%(g/g)之間，由高到低依次為西安、北京、貴州、四川。醇溶性浸出物變化在 10.8%~17.0%(g/g)之間，由高到低依次為西安、貴州、四川、北京。馬齒莧中水溶性浸出物含量總體高于醇溶性浸出物，產于西安的馬齒莧藥材水溶性、醇溶性浸出物含量均高于其它產地。
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不同產地的馬齒莧藥材中多糖、總黃酮含量存在較大差異，其多糖含量變化幅度為 3.54%~9.98%，由高到低依次為西安、四川、貴州、北京�？傸S酮含量變化幅度為 0.77%~0.97%，由高到低依次為四川、貴州、西安、北京。兩種成分含量變化與產地無必然聯系。馬齒莧藥材因產地不同，其多糖和總黃酮含量存在較大差異，產地對馬齒莧中活性成分的含量有較大影響。
3.2 討論
3.2.1 活性成分、浸出物含量與馬齒莧藥材質量的關系
馬齒莧含多種化學成分，國內外學者已從馬齒莧中提出許多化學成分，主要包括：多糖類、黃酮類、生物堿類、有機酸類、萜類、揮發油類等，此外還含有多種蛋白質、礦物質、維生素、果膠等。多糖、黃酮等成分藥理作用明確。水浸出物中主要含多糖、蛋白質、維生素、黃酮類、苷等水溶性成分，醇溶性浸出物中含游離黃酮、甾體、生物堿等成分含量較高。浸出物、活性成分的含量高低能反映馬齒莧質量的優劣。因此若以多糖含量做標準，西安和貴州的馬齒莧質量較好，北京的質量最劣;若以總黃酮含量為標準，四川的馬齒莧質量最好，含量為 0.97%;若以水浸出物含量為標準，西安和北京的馬齒莧質量較好;若以醇浸出物含量為標準，西安和貴州的馬齒莧質量較好。但浸出物含量與活性成分含量并不十分吻合，西安的馬齒莧無論醇浸出物還是水浸出物的含量均為最高，但其總黃酮含量在四產地中僅排第三，含量只有 0.78%;水浸出物含量較高的北京產地的馬齒莧多糖含量卻最低，只有 3.54%。因此，評價馬齒莧質量不能僅以浸出物含量或個別活性成分含量為依據，應綜合評價。
3.2.2 浸出物的測定
浸出物的測定是中藥材品質評價方法之一，測定藥物的總固體量，一般用于該藥材的活性成分或指標性成分不清或含量很低或尚無精確的定量方法時采用。馬齒莧化學成分復雜多樣，藥理作用廣泛，單個成分的含量不能全面反應藥材的質量。2015 版《中國藥典》中未對馬齒莧藥材中有效成分有相關規定，本實驗通過對馬齒莧藥材浸出物含量進行測定，初步對其有效成分進行研究。實驗結果表明，不同產地的馬齒莧藥材浸出物含量差異較大，西安產的馬齒莧藥材水溶性浸出物含量最高，四川最低，之間含量相差近二倍。醇溶性浸出物含量結果為西安最高，北京最低。水溶性浸出物含量和醇溶性浸出物含量沒有必然聯系。
因此，為了規范市場中馬齒莧藥材的質量，建議藥典中對馬齒莧藥材浸出物的測定制定相關標準。
3.2.3 提取方法的確定
目前對馬齒莧中多糖和黃酮化合物提取方法研究主要集中在有機溶劑提取法、超聲波法、微波法、酶解法和大孔樹脂法等。其中溶劑提取法中溶劑消耗大、提取時間長，而且操作復雜;采用酶解法時酶的使用會增加提取成本;超聲波提取可極大地提高提取效率，節約溶劑，避免高溫對提取成分的影響，與常規提取法相比，具提取時間短、產率高、無需加熱等優點[10]。因此，本實驗選用超聲波提取法提取馬齒莧多糖和黃酮成分。此外，在試驗過程中對比了直接超聲提取和浸潤后超聲提取兩種方法對馬齒莧中多糖提取率的影響。結果表明，先浸潤后超聲提取方法的多糖提取率明顯高于直接超聲提取。并對浸潤時間做了相應考察，結果表明，經浸潤 10 h 后超聲提取馬齒莧多糖提取率較高，因此，實驗中采用浸潤 10 h 后超聲提取的方法對馬超中多糖和黃酮化合物進行提取。
3.2.4 馬齒莧中多糖、總黃酮含量測定結果探討
馬齒莧為《中國藥典》收載的藥材，筆者按照藥典的方法對北京、四川、貴州、西安四產地的馬齒莧藥材進行了性狀鑒別、顯微鑒別、薄層鑒別、水分檢查。結果顯示，四產地馬齒莧質量均符合藥典規定。但本文實驗結果顯示，馬齒莧中多糖、總黃酮含量存在較大差異，多糖含量為 3.54%~9.98%，總黃酮含量為 0.77%~0.97%。同時，也有文獻報道其他地區馬齒莧多糖、黃酮含量差異很大[11,12]，這可能是因為不同產地的氣候條件、土壤條件、地形條件和生物條件等影響因素不同，使其藥材質量參差不齊。此外，馬齒莧中有效成分復雜多樣，《中國藥典》中對馬齒莧的成分及其含量無相關規定，建議對馬齒莧中活性成分進行進一步研究，并重新修訂馬齒莧質量標準，增加對多糖、總黃酮等活性成分的規定。
SCISSCIAHCI
