發布時間：2015-10-17所屬分類：醫學論文瀏覽：1次
摘 要： 正確認識什么是地高辛以及它的作用及治療方式有哪些呢， 并且它的危害又有哪些呢?應該怎樣來確保及監測這項技術呢?本文選自：《藥學與臨床研究》,《藥學與臨床研究》編委會是編輯部的強大后盾，其職責是把握報道方針及選題方向，審定論文學術水平，指導編輯
正確認識什么是地高辛以及它的作用及治療方式有哪些呢， 并且它的危害又有哪些呢?應該怎樣來確保及監測這項技術呢?本文選自：《藥學與臨床研究》,《藥學與臨床研究》編委會是編輯部的強大后盾，其職責是把握報道方針及選題方向，審定論文學術水平，指導編輯出版工作，保證刊物學術水平和質量。自創刊以來，《藥學與臨床研究》共有四屆編委會，歷屆編委會成員中醫藥行業專家，如彭司勛、王明貴、蔡寶昌、朱東亞等均擔任過(或正在擔任)《藥學與臨床研究》的重要職務。2010年進行了編委會換屆工作，成立了新一屆的編委會。本屆編委會由中國工程院院士、973首席科學家和知名專家、教授組成。
摘要：地高辛，用于各種急性和慢性心功能不全以及室上性心動過速、心房顫動和撲動等。通�？诜�，對嚴重心力衰竭患者則采用靜脈注射。為由毛花洋地黃中提純制得的中效強心苷，其特點是排泄較快而蓄積性較小，臨床使用比洋地黃毒苷安全�？诜詹煌耆�，也不規則，生物利用度約為75%～88%。吸收率約50%～70%，起效時間為1～2小時，最大作用3～6小時，作用維持的時間4～7天。靜脈注射經10～30分鐘生效，2～4小時達最大效應，3～6天后作用消失。地高辛從尿中排出主要為原形物，少量為代謝物。
關鍵詞：地高辛,檢測方法,論文發表
1?免疫測定法(IA)
1.1?放射免疫測定法(RIA)
RIA法測定體內地高辛血藥濃度基本原理:將標記了抗原的放射性核素與受檢標本中的抗原同時競爭抗體,檢測標記到的抗原抗體復合物的放射性強度,推斷并確定地高辛的濃度。其檢測限可達0.01 μg/L,平均回收率為101.3%,日內RSD=3.0%,日間RSD=6.5%[1]。RIA法優點:檢測方法相對簡單,結果準確可靠,敏感性強、精密度好,準確度佳、具有特異性,檢測成本較低等。RIA的缺點:檢測時間較長,標記物的半衰期過短,易受代謝產物的干擾,存在不同程度的放射性污染,試劑盒有效期短且批間RSD偏大等[2]。
1.2?酶免疫測定法(EIA)
EIA法是一種非放射性免疫分析技術,其在放射免疫分析理論的基礎上,用酶標記抗原或抗體作為示蹤物,酶標記物穩定,靈敏度與RIA法接近,靈敏度高,操作簡便快捷,EIA法在一定程度上克服了RIA放射性危害和標記物半衰期短的缺點[3],具有較強的特異性,有效期長等特點。
1.2.1?酶聯免疫吸附分析法(ELISA)?ELISA法靈敏度可高達0.04 ng/mL,是一種非均相免疫分析法的檢測技術,有很高的檢測的準確性和可靠性,實驗條件的環境要求較高,樣品不需做預處理且需求量較少,僅需5.0 μL,有效避免地高辛樣活性物質的干擾。缺點主要是人為因素干擾檢測結果,酶穩定性在孵育時間較長的情況下降低,長時間容易受到溫度和pH的影響,影響檢測結果精確性[4]。
1.2.2?克隆酶免疫測定法(CEDIA)?克隆酶免疫測定法原理:β-半乳糖苷酶通過DNA技術被裂解成2個無活性片段,酶受體和酶供體;兩個活性片段重組后形成具有催化活性的酶。β-半乳糖苷酶的水解底物氯酚紅-β-D-吡喃半乳糖苷顯紫紅色,而地高辛的血藥濃度與該酶生成量成正比。克隆酶免疫測定法與放射免疫測定法具有良好的相關性,具有較好的可靠性[5];批內和批間變異系數均低于5%,具有較好的精密度[6];檢測速度快,且易于自動化操作、無放射性污染。
1.3?熒光免疫測定法(FIA)
熒光免疫分析技術是發展比較早的一種標記免疫技術,以熒光物質標記抗體而進行抗原定位,主要應用于微量、超微量位置分析測定。
1.3.1?熒光偏振免疫測定法(FPIA)?熒光免疫測定法是一種以熒光物質標記抗體而進行抗原定位的技術,常用于微量和超微量物質的分析測定,作用原理:以蛋白競爭結合原理為基礎,利用被測物質中被測對象所具有的偏振光特性進行測量,其不需分離游離及結合的熒光標記物,測定周期短,無放射性污染。本法樣品預處理操作簡單,測定過程耗時較少,靈敏(最小檢出量為0.01 ng/mL),誤差范圍約2.57%~4.00%[7],雅培TDX儀的最低檢測限約為0.26 ng/mL[8],但FPIA測定結果易受本底熒光的干擾,所用儀器較復雜,地高辛濃度增加的假象時有發生[9]。
1.3.2?時間分辨熒光免疫測定法(TRFIA)?TRFIA是一種操作簡便,不受樣品自然熒光干擾的新型非放射性免疫標記技術,采用的示蹤物取代傳統的熒光標記發光物質,運用新的熒光特性的鑭系元素及其螯合物,測定反應產物在反應體系發生后的熒光強度,用體系中分析物的濃度根據產物熒光強度和相對熒光強度的比值來判斷,從而達到定量分析[10]。同RIA法相比,本法靈敏度大大的提高;交叉反應率低于FPIA法[11],無放射性污染,示蹤穩定可多標記,標準范圍寬等優點。
1.4?化學發光免疫測定法(CLIA)
CLIA法檢測原理:當被化學發光劑、催化發光酶或產物等標記的抗體或抗原與相應的抗原或抗體結合后,發光底物受上述標記物的影響與產物發生氧化還原反應,激發熒光物質發射可見光,用分光光度計測量反應發射的可見光。最低檢測限可達0.1 ng/mL,線性范圍為0~4.0 ng/mL,日內RSD<4%,日間RSD<6.5%[12]。如有臨床癥狀難以鑒別或懷疑藥物過量中毒,可快速檢測。儀器設備及配套試劑目前較常用的是美國ACS:180 PLUS化學發光儀。本儀器靈敏度較高,但機器較貴、檢測費用較高,在臨床有一定的限制[13]。
1.5?干化學測定法(Dry chemical assay)
Dry chemical assay以異種酶排斥免疫為原理,結合了干化學分析技術和自動生化分析儀測定地高辛血藥濃度[14]。操作程序很大程度的簡化使得操作更簡便,大大縮短了檢測時間,地高辛濃度在0.5~4.0 μg/mL的有良好的線性關系(R =0.998 9),平均回收率為99.0%,日內平均RSD=4.5%,日平均相對標準偏差=4.8%。本法測試成本小,操作簡便[15]。然而,有研究表明,本法平均測量值高于FPIA法[16]。
1.6?乳膠免疫抑制法(Emul Immuunodepression)
本法標本用量小,對環境無污染,檢測速度快,但檢測結果穩定性上尚存在一些問題,目前應用較少[17]。
2?液相-質譜聯用分析法(HPLC-MS-MS)
檢測質量與放射免疫測定法相比,特異性較強,能夠克服RIA法測定地高辛濃度時因EDLS產生的干擾,但本法所需儀器價格昂貴、操作繁瑣、靈敏度較差、檢測耗時較長,大大阻礙了其臨床推廣[18]。
3?毛細管電泳分離法(CE)
毛細管電泳兼有電泳和色譜技術的雙重優點,對發生溶血、高脂血癥、黃疸的血漿樣本的分析有一定優勢[19],但很少用于地高辛檢測。
4?人工神經網絡法(ANN)
人工神經網絡法(ANN)是基于模仿生物大腦的結構和功能,從而構成的一種電腦信息處理系統。利用收集的臨床資料,如地高辛使用者的年齡、性別、體重、血藥濃度、劑量等作為神經元。神經元之間既有聯系又相互獨立,既有局部的存儲和計算能力,又通過連接構成統一的系統。ANN以具有局部計算能力的神經元為基礎,實現信息的大規模并行處理,以預測地高辛的血藥濃度[20]。使用MATLAB軟件中的BP神經網絡工具箱編程,對數據進行篩選和智能分析,建立相應的數學模型,較好地處理各個因素的復雜關系,具有很好的非線性處理能力。本法在繁雜的群體藥效/藥動學方面發揮著普通計算機無法比擬的優勢,為血藥濃度預測提供了一條有效的思路,在臨床藥學領域擁有誘人的應用前景。
5?分子印跡技術
應用分子印跡的技術制備對地高辛有特異吸附性能的印跡聚合物顆粒,再將顆粒與瓊脂糖混合,并固定與玻碳電極上,制備成地高辛分子印跡聚合膜傳感器。傳感器可以特異性的結合膜分子地高辛,且其電化學信號與模板濃度有關,再用它來檢測血漿中地高辛的含量。本法制作簡單,成本低,特異性高,檢測快速,穩定性好最低檢測下限可達1.28 nmol/L,線性檢測范圍為1.28~128 nmol/L,檢測時間可短至5 min,可靠性佳[21]。
此外,逆轉錄PCR技術、抗地高辛抗體片段技術[22]等也日趨成熟,今后可能會用于地高辛血藥濃度的檢測。各種地高辛檢測方法均以其各自獨特的優勢在臨床廣泛應用,地高辛的檢測技術將日益成熟、規范。
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